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GB 4789.3 大肠菌群的检测适用方法解读及注意事项汇总
GB/T 4789.3-2003 大肠菌群测定

03版只有一个方法:MPN法,也有人叫九管法。

阳性的方法步骤:
制样→接种到乳糖胆盐发酵管→伊红美蓝培养基→乳糖发酵管(同时做革兰氏染色)→看表计算。
其实这个方法比较简单的一个方法,也是常说的半定量的方法。

 
我们下面说一下这个方法的注意事项。
第一,这个方法是一个半定量的方法,最不好要用于测量审核上。
 
第二,做实验前要注意导管里是否有空气(最好使用大直径的小导管),以免影响结果的判断,增加工作量。
 
第三,经常有人会无视标准有一个粪大肠的检测步骤。这个很少人会去做。
 
第四,对伊红美蓝的阳性现象不了解(其实实验室可以在做出阳性结果之后,将菌接出来,以后用来做人员培训)。
 
第五,对标准是否还在实行不清楚,很多人在16版出来的时候,都在问03版是不是也作废了,其实并没有。03版目前还在执行着(毕竟还有些标准还在用着它的单位)。

 
 
GB 4789.3-2016  大肠菌群计数

这个标准里有两个方法:MPN法和平板计算。

首先说MPN法,它相对于03版的MPN有一定的区别。第一这两个方法用的培养基完全不一样。第二16版的方法没有伊红美蓝画线,这样的过程减少了一步相对简单一点。第三单位变了。
平板法:其实平板是我们目前用得最多的一个方法,步骤看标准的实验流程图。
 
那么平板法有什么注意的呢?
 
第一,做平板法的时候需要覆盖第二层培养基,它的作用是:有助于典型菌落形成也为了防止蔓延性细菌生长。
 
第二,挑菌,其实这一步主要怕挑菌的时候挑不到菌,其实你可以把带菌的部分培养基完全挑起来(不要怕培养基包含着它出不来)放到BGLB内,然后用手腕力摇一下试管就可以把培养基打碎。
 
第三,计算问题,标准挑取10个典型菌落。然后计算比例再乘以所有典型菌落的数(有人会在这里纠结,觉得不太准确,应该所有菌落都挑取)其实这个一个想法很好,但是这样之后增加工作量的同时影响效率。其实在平板上你应该区分典型菌落出来去做就可以(当然这步要考验一个人的眼力和经验)初学者可以根据形态进行分类,然后以形态特征进行验证。


两个版本的一些检测方法和注意事项都说了,那么我们说一下一些朋友常问的一些问题。

1. 03版的结果能不能和10版的结果进行换算和比较。
答:其实换算是不行的,这个两个不同的标准。如果只是进行比较两个结果是可以的,但是不建议。
 
2.如何选择检测方法?
答:你要根据产品的执行标准去选择检测方法,不是说你喜欢那种就可以用那种。
 
3、同一批产品,检测的两份结果不一样,是不是那里出问题?
答:其实不是出问题,这个是正常的,同一批产品不代表他们的微生物检测结果是一模一样的,如果是这样也没必要做五份去验证产品合格了吧?如果说同一份样品(制成一份样)出现结果差好远的话,这里就要去分析那里出问题。

 
好像就这些问题比较常见。

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